產品簡介
PRM(平行反應監測,parallel reaction monitoring)是一種基于高分辨、高精度質譜的離子監測技術,能夠對目標蛋白質、目標肽段(如發生翻譯后修飾的肽段)進行選擇性檢測,從而實現對目標蛋白質/肽段進行絕對定量。

PRM技術是在多反應監測(multiple reaction monitoring, MRM)技術的基礎上演化而來的。它基于高分辨、高精度質譜(如Orbitrap系列),首先利用四級桿質量分析器的選擇檢測能力,在一級質譜中(Q1)選擇性地檢測目標肽段的母離子信息;隨后在collision cell中對母離子進行碎裂;最后利用高分辨、高質量精度分析器在二級質譜中檢測所選擇的母離子窗口內的所有碎片的信息。這樣即可對復雜樣本中的目標蛋白質/肽段進行準確地特異性分析。



技術原理
PRM是相對千傳統SRM/MRM建立起來的高分辨率離子監測技術。 PRM基千Q-Orbitrap為代表的四級桿-高分辨質譜平臺,與SRM每次掃描一個Transition不同,PRM每次對一個母離子產生的所有Transition進行全掃描,即平行監測了一個母離子對應的所有離子對。 PRM質譜分析經過三個階段:1.通過MS篩選出與目標分子特異性一致的母離子; 2.碰撞碎裂這些母離子,去除其他離子的干擾; 3.只對選定的特異MS/MS2離子進行質譜信號的采集。 PRM質譜技術是高精準度的蛋白定量鑒定技術,是一次性精準定量研究復雜樣品中多個目標蛋白的絕佳方法。 如果借助同位素標記的目標脈段作為內參,可以實現蛋臼絕對定量鑒定。


項目流程


技術優勢

1高分辨離子監測,質量精度達ppm級,在不損失靈敏度的清況下,最大程度排除了背景干擾;
2.MS2為全掃描,無需事先確定離子對和優化碰撞能量,只需要在數據處理時選擇響應最高的一個或幾個離子即可提取母離子對的色譜峰進行定量,線性范圍可達5-6個數量級;
3. 同時定性與定量分析,二級全掃描譜圖用于定性分析,選擇其中最佳的子離子提取離子對即可完成定量分析。

與傳統WB/ELISA相比有獨特優勢


應用領域
生物標志物驗證驗證蛋白翻譯后修飾驗證低豐度蛋白


樣本要求
蛋白提取物總蛋白量不低于200μg


檢測周期
樣本質檢合格后,5-7周

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